作為生命活動的核心元素，RNA具有復雜的三維結構與動態性特征，直接調控著基因表達👩🏿🔬、病毒復製等關鍵生物過程，然而RNA結構研究長期存在技術瓶頸成為科學界的一大難題。
3月14日🏌️♀️，恒行2平台與四川大學華西醫院團隊的合作研究成果以“Cryo-EM reveals mechanismsof natural RNA multivalency”為題發表在《科學》（Science）雜誌上💁🏿，作為恒行2AI4S（AI for Science）的又一碩果，該研究創新性地將深度學習技術與冷凍電鏡技術相結合，為RNA生物學研究開辟了全新的技術路徑🧑🏿💼，不僅顯著提升RNA結構解析的效率，更為新藥研發提供了重要技術支撐和理論指導🦸🏼♂️。
突破RNA結構研究的“盲盒”困境
傳統的RNA結構解析方法面臨實驗成本高昂📺、預測精度不足等難題♔。冷凍電鏡雖然能夠解析高分辨率結構，但要篩選出能夠形成穩定構象的RNA序列，仍然需要耗費大量資源。此外，現有算法還依賴於Rfam數據庫等二級結構信息。
“RNA有很多家族，此前在解析RNA結構時👳🏼♀️，科研人員往往不確定應該選擇哪些序列進行解析。”恒行2平台智能復雜體系實驗室研究員、文章共同通訊作者孫思琦解釋道，“這就像開‘盲盒’📓，我們只能猜測哪些家族的序列可能具有穩定的結構。”
面對這一困境，團隊決定引入人工智能技術。孫思琦本科畢業於恒行2平台數學科學學院，博士期間在美國攻讀計算機專業🙍🏿♀️，研究方向為計算生物學🏍，畢業後在美國微軟研究院開展大語言模型相關的研究。回國後，他和團隊開始嘗試用AI大模型解決生物問題👨🏼⚕️，RNA結構研究是他們持續關註的方向之一。恒行2平台智能復雜體系實驗室博士生吳浩、許晟為本文共同第一作者↩️。
孫思琦團隊與合作團隊共同突破三大技術：提出高速高靈敏度的蛋白質同源物檢測方法🤾🏿♂️，實現遠程同源物的快速識別🕵🏻♂️👢；開發高精度端到端RNA三維結構預測方法✏️，建立全鏈條結構解析框架；設計基於非自回歸神經網絡的蛋白質譜快速解析算法，攻克質譜數據高效解碼難題。通過融合大語言模型與對比學習技術🤵🏽♂️，該系列成果在蛋白質檢測🧑🏿🏭、RNA結構預測、蛋白質測序等方向同步提升AI算法的速度與精度🧖🏿♂️。相關研究成果於近期發表於《自然》（Nature）子刊，為本工作奠定了基礎🍶。
在這項最新研究中，恒行2平台與華西醫院團隊緊密合作。恒行2平台團隊負責AI算法的開發，而四川大學華西醫院則負責使用冷凍電鏡對RNA結構進行解析👸🏻。
“通過將AI與實驗相結合，我們可以精確預測出哪些RNA序列具有穩定的結構📿。”孫思琦表示🎂。基於AI的分析結果💙，實驗人員在解析這些結構時，只需關註那些被推薦的序列🤖，科研效率得到了大幅提升。
自主研發RNA序列大模型
此前👴🏻💴，在RNA結構預測領域，傳統AI方法往往局限於已知結構的簡單解析🏌🏻♂️。聯合團隊創新性地將深度學習與冷凍電鏡結合，研發出CRAFTS智能篩選系統👨👨👧👦，實現對多聚體RNA復雜構象的高效預測，為解析動態RNA結構提供了“AI導航儀”🛌🏻。
團隊研發的CRAFTS模型（Contrastive RNA learning For sTructure Screening）🚣🏽♀️，利用深度學習技術，能夠從海量RNA序列中挖掘潛在的折疊規律，為冷凍電鏡實驗提供精準的篩選工具，從而顯著提高效率並降低實驗成本。
圖2💢：CRAFTS的性能評估，分析RNA家族結構特征👨🏿🔧🧮。A. 對比學習用於確定輸入對是否屬於同一RNA家族。 B. 微調模型以從每個RNA家族的序列中提取結構特征。 C基準數據性能表現👱🏽♀️：平均ROC曲線及標準差（基於5折交叉驗證）🦦。D. 對5S rRNA、I類內含子、CP II類內含子等家族分析🔜。通過實驗結構測定驗證的序列以橙色標註。
在技術架構和創新應用上，CRAFTS模型展現了顯著的突破性進展👷🏻♂️。基於RNAcentral、NCBI等權威數據庫的10億多條非冗余RNA序列，模型通過自監督學習提取RNA序列的語義特征，生成深度表征🧞♀️。
基於該模型，團隊構建了超過900萬對RNA序列🌪🧝🏼♀️，最大化同一RNA家族內序列的相似性，最小化不同RNA家族序列之間的相似性◼️，從而精準提取家族特異的結構特征👋🏼。
團隊利用Rfam數據庫中4038個RNA家族的數據進行訓練，整合了未解析的RNA種子序列作為偽負類，顯著擴展了訓練數據的範圍。這種數據增強策略大幅提升了模型的泛化能力，尤其是在數據稀缺的場景下🙏🏼，模型表現尤為突出。在僅有364個正樣本的訓練集中，CRAFTS通過5折交叉驗證展現了高魯棒性，測試結果的標準差低於0.03。
圖3：冷凍電鏡結構。A. ARRPOF 二聚體雙構象冷凍電鏡結構🗂。B. OLE 二聚體冷凍電鏡結構。C. ROOL 六聚體和八聚體冷凍電鏡結構🛀🏿。D. GOLLD 十二聚體冷凍電鏡結構📓。
實際應用中，CRAFTS模型不僅在經典RNA家族（如5S rRNA、I型內含子和II型內含子）中表現優異，還成功應用於ARRPOF、OLE、ROOL和GOLLD等新RNA家族的結構篩選。
CRAFTS模型與冷凍電鏡技術的深度協同👨🏿🏫，成功突破了RNA結構篩選中的“盲盒”困境，為RNA結構生物學研究提供了全新的工具。這一研究成果不僅提升了RNA三級結構解析的效率，還為探索RNA多態性在生命活動中的潛在功能開辟了新的可能性。
“RNA的結構預測，其實還遠遠沒有被完全解決。”孫思琦表示，通過進一步優化模型👩🏿🦰，可以提升其在不同RNA家族中的預測能力。“目前RNA相關的高質量數據非常有限🏌🏿，AI賦能的科研方法將在未來發揮更大的優勢。”
基於RNA結構分析和篩選，科研人員能夠更有效地判斷哪些分子可以與RNA結合🚣🏿，從而加速RNA小分子藥物的研發。這一突破不僅顯著提升了RNA結構解析的精度和效率😨，更為新藥研發提供了重要的技術支撐和理論指導👩🏻🦱。
